儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對運(yùn)動時，經(jīng)過反復(fù)多次的“吸附-解吸”的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣本濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出檢測結(jié)果。

高效液相色譜儀方便易用的流量和壓力校正功能，確保儀器的高精度和穩(wěn)定性；采用靜態(tài)電機(jī)控制電路，實(shí)現(xiàn)電機(jī)控制信號的自動反饋跟蹤功能，有效提高電機(jī)控制精度，確保了泵的可靠性及穩(wěn)定性；通用樣品池設(shè)計(jì)，微量與常量池之間更換方便。

高效液相色譜法適于分析沸點(diǎn)高、相對分子質(zhì)量大，受熱易分解的不穩(wěn)定有機(jī)化合物、生物活性物質(zhì)以及多種天然產(chǎn)物。局限性：

1.離效液相色譜法中需使用多種溶劑，其成本比氣相色譜法髙，且易引起環(huán)境污染；當(dāng)進(jìn)行梯度淋洗時，操作比氣相色譜的程序升溫操作復(fù)雜。

2.高效液相色譜法中缺少像氣相色譜法中使用的熱導(dǎo)池檢測器，氫火焰離子化檢測器那樣的通用型檢測器。

3.髙效液相色譜法不能替代氣相色譜法去完成要求柱效達(dá)10萬塊理論塔板數(shù)以上的，組成復(fù)雜的石油樣品分析。也不能替代中、常壓柱色譜法去分析受壓易分解、變性的生物活性樣品。